技术文章您的位置:网站首页 >技术文章 >使用Cary 3500可见分光光度计-壳聚糖载药系统的平行合成与表征

使用Cary 3500可见分光光度计-壳聚糖载药系统的平行合成与表征

发布时间:2020-04-08   点击次数:331次

前言 :稳定、可控的生物兼容性载药系统非常重要,并对药物和疫苗给药系统有显著影 响[1, 2]。寻找创新和改进的新方法来制备载药系统,可以避免使用生物兼容性较低的 材料,并提供更稳定的载体以及更容易的制备途径[3]。

 

壳聚糖是一种存在于甲壳类生物(例如螃蟹和龙虾)壳中的多糖。因具有高度稳定 的化学活性、生物兼容性和控释能力而得到广泛研究[1, 4, 5],本研究也选择它作为研究 对象。壳聚糖溶于弱酸性水性溶剂,可通过共价或离子交联形成各种尺寸和形状的 水凝胶装置。聚磷酸盐常用于制备壳聚糖纳米和微米颗粒。本文中,我们研究了一 种新型聚磷酸盐(八磷酸四苯基卟啉 (OPP))诱导壳聚糖水凝胶化,它是一种光活性 生色分子,可用作壳聚糖交联剂(图 1)。壳聚糖与 OPP 交联,自组装成 OPP 生色团。该机制导致光谱变化,并可使用紫外-可见光谱法来监测 这一变化。

阴离子形式的 OPP 膦酸基团(图 1)与壳聚糖的质子化胺发 生强烈相互作用,使溶液中的聚合物链发生交联。这个过程可 形成直径约 1 µm 的颗粒,能够包埋各种生物活性化合物(例 如疫苗抗原或药物)。

 

本研究中,我们使用 Agilent Cary 3500 紫外-可见分光光度计 对 OPP-壳聚糖的交联机理进行了监测与研究。Cary 3500 能 够通过软件来控制样品池中的搅拌,并且对环境光不敏感,因 此特别适合此项研究。其光不敏感性可实现按顺序添加试剂, 而不会影响基于时间的测量数据。通过原位合成,大程度减少了操作步骤。

 

实验部分:壳聚糖-FITC-OPP 水凝胶微粒的制备与监测 本实验使用了异硫氰酸盐荧光素 (FITC) 标记的壳聚糖的 1% 乙酸溶液。按照以下步骤将壳聚糖溶液逐步加入固定体积的 OPP 溶液中制备样品: 1. 将 2 mL 0.125 mg/mL 的 OPP(pH 值约为 7)加入装有星 形 PTFE 磁力搅拌子的 3.5 mL 石英样品池中2. 将装有水的样品池放在参比通道中作为对照 3. 然后使用 1 mol/L 盐酸 (HCl) 将 OPP 溶液的 pH 调至 4.5,以匹配壳聚糖溶液的 pH。这确保了交联过程中观察 到的变化与 pH 值的变化无关 4. 平衡 20 秒后进行波长扫描 5. 根据表 1 少量添加一系列 2% w/v 壳聚糖-FITC。每次添加 后平衡 20 秒,然后进行波长扫描 6. 完成壳聚糖-FITC 添加后,加入 1 mol/L 氢氧化钠 (NaOH) 使 pH 值恢复为 7。再次平衡 20 秒后进行波长扫描

结论:使用 Cary 3500 双池紫外-可见分光光度计对新型生物聚合物 载药系统(壳聚糖-FITC-OPP 水凝胶微粒)的合成进行了监 测。Cary 3500 具有软件控制的搅拌功能,可直接将溶液添加 到样品池中进行合成。通过波长扫描对合成进行持续监测,可 以确定纯交联剂的吸收峰何时从 417 nm 移至 425 nm。峰位 移表明已发生交联,水凝胶微粒已经形成。

 

 

在线咨询
在线客服
咨询热线

18602175640

[关闭]