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婴幼儿食品和乳品中脂肪酸的测定

发布时间:2020-06-01   点击次数:259次

引言:脂肪作为人体的三大供能营养素之一,对人体有许多重 要的生理作用。油脂中90% 以上是脂肪酸,而脂肪酸又 分为饱和脂肪酸、单不饱和脂肪酸和多不饱和脂肪酸。 多不饱和脂肪酸中含有的n-6和n-3脂肪酸属必需脂肪酸, 是人体无法合成而必须从食物中获取的。 婴儿体格、智力和行为的发育除了受先天因素和早期教 育的影响外,还与后天的营养状况有很大关系。日本营 养学专家饭野节夫的研究结果表明,儿童的脑力发展 80% 以上取决于营养。而在众多营养素中,脂肪酸与智力发 育有密切关系是受到学术界肯定的。中国农业大学食品 学院营养与食品安全系系主任何计国副教授说:“在注 意膳食脂肪合理摄入量的同时,必须考虑各种脂肪酸的 搭配。适宜比例的脂肪酸摄入,能降低患肥胖、心血管 疾病的危险性,并促进胎儿、婴幼儿大脑和视觉的发育。” 因此,婴幼儿食品中脂肪酸的组成引起人们的重视,卫 生部于 2010 年发布食品安全国家标准《GB 5413.27-2010 婴 幼儿食品和乳品中脂肪酸的测定》[1],规定了脂肪酸的检 测方法,本方法依据该标准方法中用气相色谱法 对婴幼儿食品和乳品中的脂肪酸进行了测定。

 

实验部分:主要仪器设备与试剂仪器:气相色谱仪,Trace 1310,美国 ThermoFisher。试剂:碳酸钠溶液,准确称取 6 g 无水碳酸钠,加水溶解并定容至 100 mL;甲苯,色谱纯;乙酰氯甲醇溶液:量取40 mL 甲醇于 100 mL 干燥的烧杯中,准确吸取 5.0 mL 乙酰氯逐滴缓慢加入,不断搅拌,冷却后转移并定容至 50 mL干燥的容量瓶中;脂肪酸甲酯混合标准溶液,100 mg/L。

 

样品前处理方法:称取 0.5 g 待测样品于 15 mL 干燥螺口玻璃管中,加入 5.0mL 甲苯,加入 10% 乙酰氯甲醇溶液 6.0 mL,旋紧螺旋盖,振荡混合后于 80℃ ±1℃水浴中放置 2 h,期间每隔 20min 取出振摇一次,水浴后取出冷却至室温。将反应后的样液转移至 50 mL 离心管中,分别用 3.0 mL 碳酸钠溶液清洗玻璃管三次,合并碳酸钠溶液于 50 mL 离心管中,混匀,5000 转 / 分钟离心约 5 min。取上清液作为试液,气相色谱仪测定。

 

样品的测定:上述衍生后的样品中,分析物浓度范围较宽,样品直接进样、稀释 10 倍、100 倍后分别进样,各组分分别以适合稀释倍数的样品进行定量。用 Thermo Scientific 全新一代的 Trace1310 气相色谱仪配 FID 检测器进行检测。样品中衍生得到的脂肪酸甲酯可以用保留时间进行定性分析,峰面积进行外标法定量。 气相色谱条件:色谱柱 TR-FAME, 100 m, 0.25 mm, 0.20 μm(P/N: 260M238P, S/N: 0036515);柱温采用程序升温条件如下:60℃ ( 保持 1 min);20℃ /min 到 160℃,保持 2 min,4 ℃ /min 到 240 ℃ ( 保 持 15 min)。 载气为高纯氮气 ( 纯度 99.999%); 流 速 1.0 mL/min。 进样口为 SSL 进样口,温度:260℃,进样模式 split,分流比,10:1。检测器温度:280℃,氢气 35mL/min,空气 350mL/min,尾吹气氮气40mL/min。

 

结论:婴幼儿食品中的脂肪酸采用乙酰氯甲醇甲酯化法生成脂肪酸甲酯,甲苯提取后进行气相色谱仪测定。该方法操作简单,重复性好,37 种脂肪酸甲酯采用 100m 的脂肪酸甲酯分析柱,得到了良好的分离。赛默飞世尔科技的 Trace1300 系列气相色谱仪用于婴幼儿食品中脂肪酸甲酯的测定灵敏度高,结果准确。

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