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了解使用自动柱前衍生超高效液相色谱法测定伏马毒素 B1、B2

发布时间:2021-02-24   点击次数:264次

前言 :伏马毒素 (FUM) 是一种强毒性的真菌毒素,有致癌性,主要污染粮食及其制品,会 导致人类与动物产生癌症与肝脏疾病,现已成为继黄qu霉毒素之后的又一研究热点。 伏马毒素的液相检测通常可以使用柱后 [1] 和柱前 [2] 两种衍生方法。食品国家标准中 柱前衍生法使用的是 OPA 衍生剂,由于衍生产物随着时间的延长会降解 [3],衍生反 应需要严格控制衍生时间。这对于实验的连续进行产生了阻碍,实验人员需要做完 一针实验以后再去处理下一针的样品,以确保每次衍生反应的时间保持一致。

 

本文使用自动进样器的自动编程功能,自动吸取 OPA 衍生剂和样品,经过混合、 等待的衍生反应步骤,建立了自动柱前衍生安捷伦超高效液相色谱方法,快速检测伏马毒 素 B1、B2。该方法避免了传统柱前手动衍生中手动混合和等待的繁琐操作和误差, 使得实验可以连续高效的进行,也确保了结果稳定性。

 

伏马毒素分析 本文采用安捷伦自动进样器进行自动化柱前在线衍生,建立了 伏马毒素 B1、B2 的在线自动衍生方法,结合超高效液相色谱 及 Poroshell SB-C18 色谱柱实现了伏马毒素的快速分离、自 动分析。

 

在 0.2-2 mg/kg 的浓度范围内,伏马毒素 B1、B2 的线性相关 性良好,回归方程和相关系数如表 2 所示。检出限分别为伏马 毒素 B1 为 0.005 mg/kg、伏马毒素 B2 为 0.011 mg/kg。且 自动衍生法的重现性良好,伏马毒素 B1 峰面积 RSD 为 2.4%, 伏马毒素 B2 峰面积 RSD 为 2.7%

 

自动衍生法减少了耗时耗力的人工操作。在以前的手动衍生法 中,需要先用移液枪取样品和衍生液,再加入样品瓶涡旋约 10 秒,等待 3 分钟(人工计时)之后上机进样。为了保证衍 生反应时间一致,必须做完一针才能去做下一个样品的前处理, 这个过程需要操作人员全程值守。但是运用自动衍生法,混合 由自动进样器完成,所有的衍生动作都由自动进样器完成,无 需值守。

 

本文所述的自动柱前衍生超高效液相色谱法,减少了耗时耗力 的人工操作,且具有良好的重现性与线性。

参考文献: 1. W.J. Kong, et al. Analysis of fumonisins B1 and B2 in spices and aromatic and medicinal herbs by HPLC-FLD with on-line post-column derivatization and positive confirmation by LC-MS/MS. Analyst, 2012, 137: 3166-3174 2. 王军淋等 . 超高压液相色谱法同时检测玉米中的伏马毒素 B1、B2、B3. 食品安全质量检测学报,2013, 4(1): 215-223 3. 权英等 . 高效液相色谱法检测玉米中的伏马毒素 B1 和 B2. 食品与发酵工业,2005,31(8): 87-90 

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