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LC/MS/MS 测定牛骨骼肌中的氨苯砜

发布时间:2022-03-10   点击次数:148次

前言:本文使用针对兽药的 Agilent Bond Elut QuEChERS 试剂盒,采用 QuEChERS 方法对牛骨骼肌进行前处理,然后采用 Agilent Poroshell 120 液相色谱柱进行高效分离,并采用Agilent 6460 三重四极杆液质联用系统对样品中亚 ppb 级浓度水平的氨苯砜进行高灵敏度检测。材料与方法样品前处理针对兽药的 Agilent Bond Elut QuEChERS 萃取盐包(部件号 G7750-10001)针对兽药的 Agilent Bond Elut QuEChERS 分散固相萃取,15 mL 萃取管(部件号 5982-4980)HPLC 条件色谱柱: Agilent Poroshell 120 SB-C18, 2.1 × 100 mm, 2.7 µm(部件号 685775-902)洗脱液: A)0.1 % 甲酸水溶液;B)乙腈进样量: 10 µL流速: 0.3 mL/min梯度: %B,在 8 分钟内线性升至 80% B温度: 室温样品瓶: 安捷伦认证样品瓶(部件号 5183-2072)系统: Agilent 1260 Infinity 液相色谱仪


质谱条件电离模式: ESI + 安捷伦喷射离子流聚焦气体温度: 325 °C气体流速: 10 L/min雾化器压力: 50 psi鞘气温度: 400 °C鞘气流速: 12 L/min毛细管电压: 4500 V (ESI+)喷嘴电压: 0 V (ESI+)系统: Agilent 6460 三重四极杆液质联用系统


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样品前处理样品粉粹将牛骨骼肌切成小块,置于洁净的塑料袋中,并在 –20 °C 下冷冻过夜。第二天只取需用量的冷冻骨骼肌,并充分混匀。将样品彻底粉碎,制得均质样品。确保所得的最终样品中无明显可见的肉块。萃取/分离取 5 g (± 0.1 g) 均质样品于 50 mL 离心管中。采用 20 µL QC 加标溶液制备 QC 样品。向除了对照空白外的其他所有样品中加入内标加标溶液 (100 µL)。盖上离心管,涡旋振荡 1 min。用分液器向每个离心管中加入 10 mL 水。盖上离心管,涡旋振荡 1 min。然后用分液器向每个离心管中加入 15 mL 乙腈。向每个离心管中直接加入针对兽药的 Agilent Bond Elut QuEChERS 萃取盐包。盖紧离心管,手动剧烈振摇 20 s,确保溶剂与所有样品充分混合,结晶聚集物完全打碎。将样品离心管以 4000 rpm 的转速离心 5 min。


分散固相萃取的净化从离心管中吸取 8 mL 乙腈上清液,移至 15 mL Agilent Bond ElutQuEChERS 兽药分散 SPE 管。将离心管盖紧,涡旋振荡 1 min。然后用标准离心机将离心管以 4000 rpm 的转速离心 5 min。取5 mL萃取液,转移至试管中,并在低于 40 °C 的温度下于氮气环境中干燥。最终残留物用乙腈:水 (1:9) 溶解并定容至 1 mL。然后将残留物通过 0.2 µm 滤膜(部件号 5190-5106)过滤并用 LC/MS/MS分析。

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结论使用 Agilent Bond Elut QuEChERS 分析牛骨骼肌中的氨苯砜获得了良好的回收率和重现性。Bond Elut QuEChERS 联用LC/MS/MS 分析,可实现肉类样品中亚 ppb 浓度氨苯砜的高灵敏度定量分析。

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